靳澜HLB固相萃取小柱的应用案例及在尿液中滥用药物及其代谢物提取检测方法

更新时间：2026-07-24

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在法医毒理学的尿液滥用药物筛查场景中，尿液样本中的目标物大多以游离态或葡萄糖醛酸结合态存在，涵盖了苯二氮卓类、代谢物等20余种不同极性的化合物，靳澜HLB小柱凭借亲水亲脂均衡的吸附特性，可通过一套通用流程完成所有目标物的高效提取，无需针对不同性质药物开发多套萃取方案。

1. 样本前处理准备

取5mL混匀后的尿液样本置于离心管中，根据目标物特性选择对应的水解方式：针对常规滥用药物，优先选择酸水解法，向样本中加入200μL 1mol/L乙酸溶液，混匀后用稀盐酸或稀氢氧化钾溶液调节pH值至5.0左右，置于80℃水浴中加热15分钟，充分释放葡萄糖醛酸结合态的代谢物；针对部分苯二氮卓类等不稳定化合物，改用β-葡萄糖醛酸酶进行酶水解，37℃水浴孵育2小时，避免目标物在高温强酸环境下发生降解；针对目标物，则采用碱水解法进行前处理。水解完成后将样本冷却至室温，以3000r/min转速离心10分钟，取上清液待上样。

2. 靳澜HLB小柱活化平衡

选用靳澜HLB 3cc/60mg规格固相萃取小柱，依次加入3mL甲醇、3mL去离子水完成活化平衡。不同于传统硅胶基质萃取柱，靳澜HLB小柱的聚合物填料拥有优异的水润湿性，即使活化过程中柱床不慎干涸，也不会对后续目标物的回收率造成明显影响，大幅降低了法医检测中珍贵样本因操作失误报废的风险。

3. 上样与淋洗净化

将预处理完成的尿液上清液全部加载到活化后的HLB小柱上，控制上样流速为1~2mL/min，依靠小柱表面的疏水相互作用、氢键和π-π作用，同时对酸性、碱性、中性的各类滥用药物实现均衡保留。上样完成后，依次加入3mL 5%甲醇水溶液进行淋洗，去除样本中残留的极性盐类、尿素等水溶性杂质，淋洗完成后开启真空装置将小柱抽干5分钟，除去柱床内残留的水分，避免后续洗脱过程中出现乳化、回收率偏低的问题。

4. 目标物洗脱与后续检测

向抽干后的小柱中加入2mL甲醇进行洗脱，收集全部洗脱液置于35℃氮吹仪下缓慢吹干，最后用100μL乙腈-20mmol/L乙酸铵缓冲溶液（体积比70:30）复溶，涡旋混匀后过0.22μm有机相滤膜，即可直接送入液相色谱-串联质谱仪进行MRM模式检测。

该方法经过大量实际样本验证，尿液中23种常见滥用药物及其代谢物的总体平均回收率可达86%±6.6%，其中21种目标物的回收率高于75%，远优于传统液液萃取、SLE液液支撑萃取的效果，无需针对酸性、碱性、中性不同性质的药物开发多套萃取方案，一套通用流程即可完成全部目标物的高效提取，大幅提升了法医毒理学实验室的毒物筛查工作效率。