靳澜HLB固相萃取小柱的应用案例及在小分子药物及代谢物提取净化的操作方法

靳澜HLB固相萃取小柱，采用聚苯乙烯/二乙烯苯共聚填料制备而成，表面同时带有亲水性与疏水性基团，对血浆中酸性、中性、碱性各类小分子药物及其代谢物都能实现均衡吸附，适配生物样本这类高内源性杂质复杂基质的提取需求。这款产品的pH使用范围覆盖1.0~14.0，无论处理酸性、中性还是碱性的血浆提取液，填料结构都不会发生任何变化，不会出现硅胶柱在不同pH环境下性能波动的问题，保证不同性质药物的回收率都能保持稳定。

它的吸附容量和载样量是常规C18键合硅胶柱的3-10倍，很多在C18柱上难以保留的强极性药物代谢物，在靳澜HLB小柱上依然能获得理想的回收率，不会出现痕量代谢物流穿损失的情况。产品核心参数表现优异：比表面积600 m²/g，平均粒径40 µm，平均孔径300 Å，大比表面积带来了更高的样品载量，即使处理1mL的高浓度血浆样本，也不会出现填料过载，洗脱曲线非常稳定，所有目标药物都能集中被洗脱出来，不会出现拖尾分散的问题。同时填料粒径分布极窄，细小颗粒占比极低，使用过程中不会被血浆中的磷脂、蛋白沉淀堵塞筛板，过柱流速更快更均匀，即使是新手操作，也能轻松获得稳定的实验结果。

在临床药代动力学研究、治疗药物监测领域，血浆样本基质极其复杂，含有大量蛋白、磷脂、胆红素等内源性干扰物，常规蛋白沉淀法得到的待测液杂质多，极易造成质谱离子源污染，影响检测结果的准确性。靳澜HLB 200mg/6mL固相萃取小柱凭借亲水亲脂平衡的特性，可同时对血浆中的酸性、中性、碱性小分子药物及其代谢物实现均衡保留，有效去除磷脂等强干扰内源性物质，得到高纯净度的待测液。该款小柱不怕干柱的特性，大幅降低了生物样本前处理的操作门槛，即使实验过程中不慎出现小柱流干的情况，也不会影响最终的回收率，避免了珍贵临床样本的浪费。

血浆样本的标准提取净化操作流程如下：首先进行样本预处理，准确移取1mL血浆样本，加入3mL pH 7.0磷酸盐缓冲液稀释，充分涡旋混匀，10000rpm离心5分钟去除沉淀的蛋白，得到待净化上清液；随后进行HLB小柱活化，依次用6mL甲醇、6mL纯水完成小柱的活化平衡，将预处理后的血浆上清液以2mL/min的流速缓慢上样，目标药物及代谢物被填料充分吸附，大部分极性内源性杂质随流出液排出；上样完成后，依次用5mL 5%甲醇水溶液淋洗去除极性杂质，再用5mL正己烷淋洗去除血浆中的油脂和磷脂，抽干小柱中的残留溶剂；最后用5mL甲醇洗脱全部目标物，收集洗脱液后45℃氮吹至干，用1mL 初始流动相复溶，过0.22μm滤膜后即可供LC-MS/MS进行定量分析。

实际应用中，该方法处理血浆样本后，磷脂去除率达到99%以上，各类小分子药物的回收率稳定在92%-98%之间，基质效应小于10%，满足生物样本分析的相关规范要求。相较于传统的液液萃取方法，靳澜HLB小柱的使用大幅减少了有机试剂的使用量，单样前处理时长缩短50%，目前已被多家医院临床检验中心、药物研发CRO公司纳入生物样本分析的常规前处理方案，为临床治疗药物监测和新药研发中的药代动力学研究提供了稳定可靠的技术保障。