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基因扩增PCR仪的基本要素与DNA复制的基本要素是一致的

更新时间:2022-08-17      浏览次数:429
  PCR是分子生物学研究重要的工具,是一种用于放大扩增特定的DNA段的分子生物学技术。基因扩增PCR仪是由外壳、变温反应腔、散热系统、加热系统、制冷系统、电子控制系统、供电系统、人机界面等各部分组成的,主要用于科研及临床的基因扩增、定性PCR基因扩增、荧光/酶免终点定量DNA基因扩增、基因芯片等其他基因分析应用的基因扩增等。
  基因扩增的基本要素与DNA复制的基本要素是一致的。
  1、DNA模板:待拷贝的DNA称为模板,它可以是双链DNA也可是单链DNA,Z后扩增得到的产物是双链状态的。
  2、引物:是DNA复制的先锋,就象结晶过程中的晶核,引导DNA的合成。在PCR扩增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。
  3、DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶):是DNA复制的动力,在dNTP等底物存在时在引物的引导下沿着模板DNA合成互补的DNA链。
  4、缓冲液:提供DNA合成反应所需的pH,离子强度等环境。
  5、4种单核苷酸:dNTP,提供DNA合成原料。
  它可以在试管里建立反应,经过数小时之后,就能将极微量的目的基因或者某一特定的DNA段扩增数十万倍,乃至千百万倍,而无需通过繁琐费时的基因克隆程序,便可获得足够数量的精确的DNA拷贝,所以有人亦称之为无细胞的分子克隆法。
  PCR反应一般设置20~40次循环,每一循环包括高温变性、低温退火、中温延伸三步反应。每一循环的产物作为下一个循环的模板。PCR的扩增效率很高,如果循环次数是30次,那么新生DNA段理论上达到230拷贝(约为109个分子)。扩增时加入的引物利用荧光素进行标记,使引物和荧光探针同时与模板进行特异性结合,扩增结果通过荧光信号采集系统实时采集信号并输送到计算机分析处理系统,实时输出量化结果。
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