WAX弱阴离子交换萃取柱是一种专用于富集和净化酸性化合物(如有机酸、磺酸类、核酸、某些药物代谢物等)的前处理工具,其填料通常为带叔胺基团的聚合物或硅胶基质,在pH>pKa+2条件下呈中性,而在较低pH下质子化带正电,从而通过静电作用吸附阴离子目标物。因其高选择性、高回收率及良好兼容性,广泛应用于环境、食品、制药及临床检测领域。正确使用
WAX弱阴离子交换萃取柱,是确保留得牢、洗得净、收得全的关键。

一、使用前准备
活化:用3–5mL甲醇或乙腈润湿填料,去除储存溶剂并激活官能团;
平衡:用3–5mL去离子水或低离子强度缓冲液(pH≈目标物pKa–2)置换有机相,使填料处于质子化状态,具备阴离子交换能力。
注意:WAX为弱碱性填料,仅在酸性条件下带正电,不可用强碱性溶液(如NaOH)活化,否则将失去交换能力。
二、样品上样
样品需调节至酸性条件(通常pH2–6),确保目标阴离子带负电且填料带正电;
样品应澄清无颗粒,必要时离心或0.45μm过滤,防止柱堵塞;
上样流速控制在1–2mL/min,避免过快导致吸附不充分。
三、淋洗去杂
用弱酸性水溶液(如5%甲醇水+0.1%甲酸)洗去中性或弱极性杂质;
可加入少量有机溶剂(≤20%)提高选择性,但避免高比例有机相导致目标物提前洗脱。
四、洗脱目标物
使用碱性洗脱液(如5%氨水甲醇、2%三乙胺甲醇或pH≥10的缓冲液),使填料去质子化,破坏离子键,释放目标阴离子;
洗脱体积通常2–4mL,分2次加入,确保洗脱;
洗脱液可氮吹浓缩后复溶,适配后续LC-MS/MS或HPLC分析。