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MCX强阳离子交换柱的常见问题相应解决方法

更新时间:2025-11-24      浏览次数:98
   MCX强阳离子交换柱凭借疏水与离子交换双重机制,成为富集碱性化合物的产品。然而,在实际应用中,常因操作不当或样本复杂性导致回收率低、背景干扰高、流速异常等问题。及时识别并解决MCX强阳离子交换柱的常见问题现象,是确保前处理高效、数据可靠的保障。

 


  问题一:目标物回收率偏低
  原因:pH控制不当、洗脱不充分或柱子未充分活化。
  对策:确保上样前样本pH≤3,使碱性目标物充分质子化带正电;洗脱液中碱性试剂浓度需足够(如5%氨水),并保证充分接触时间。每次使用前严格按“甲醇→水”顺序活化,避免柱床干涸。
  问题二:杂质干扰严重,基质效应明显
  原因:淋洗不到位或样本过脏未预处理。
  对策:优化淋洗步骤,可增加一次含10–20%甲醇的酸性水溶液(pH3)冲洗,去除中等极性干扰物。对于血浆、土壤等复杂基质,建议先进行蛋白沉淀或离心过滤,减少大分子堵塞与非特异性吸附。
  问题三:流速慢或堵塞
  原因:样本含颗粒物、蛋白质未去除或柱头污染。
  对策:所有样本必须预先离心(10,000rpm,5min)或过滤(0.45/0.22μm滤膜)后上样。若已堵塞,可尝试反向冲洗(从出口向入口通水或甲醇),但压力不宜过高。严重堵塞需更换柱子。
  问题四:空白背景高或出现鬼峰
  原因:洗脱溶剂不纯、柱子污染或洗脱液未充分挥发。
  对策:使用高纯度甲醇、乙腈和氨水配制洗脱液。每批次新柱子建议先用高浓度洗脱液空走一次“预清洗”。氮吹复溶时确保溶剂挥发,避免残留氨水在质谱中产生离子抑制。
  问题五:柱子重复使用后性能下降
  原因:强保留杂质累积、固定相流失或pH超出耐受范围。
  对策:MCX柱一般不建议重复使用,尤其处理生物样本时。若需再生,可用5–10倍柱体积的5%异丙醇/5%甲酸水溶液冲洗,再重新活化。避免使用pH>12或<1的溶液,以防硅胶基质溶解或键合相水解。
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